沈慕顏的話總是能在看似無望的境地里,指出一點(diǎn)可行的方向。
老吳沉默了一下,點(diǎn)頭:“也行。死馬當(dāng)活馬醫(yī)。小孫,去準(zhǔn)備點(diǎn)氫氧化鈉和鹽酸,濃度按……”他看向沈慕顏。
沈慕顏立刻接上:“先用0。5m的naoh處理,再用去離子水洗至中性,接著用0。5m的hcl平衡,最后再用平衡緩沖液充分平衡。我們一步步來,隨時(shí)檢測(cè)ph和電導(dǎo)。”
小孫聽得有些咋舌,但還是麻利地應(yīng)了聲好,轉(zhuǎn)身去準(zhǔn)備試劑了。
老吳則開始清洗一些可能用到的玻璃層析柱和管路。
準(zhǔn)備工作瑣碎而耗時(shí)。
配制溶液,調(diào)試ph計(jì),清洗、預(yù)處理那包古董deae-纖維素……每一步都需要耐心和細(xì)致。
沈慕顏和老吳分工合作,一個(gè)負(fù)責(zé)調(diào)配和檢測(cè),一個(gè)負(fù)責(zé)裝填和沖洗,小孫則負(fù)責(zé)傳遞物品和記錄初步參數(shù)。
過程中難免遇到問題。ph計(jì)讀數(shù)不穩(wěn),需要反復(fù)校準(zhǔn)。
預(yù)處理后的纖維素依然有些板結(jié),流速很不理想。
連接管路的硅膠管老化,差點(diǎn)漏液……每當(dāng)小孫有些焦躁或老吳又開始皺眉搖頭時(shí),沈慕顏總能及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題所在,提出調(diào)整方案,語氣始終平穩(wěn)。
“孫同志,別急,ph計(jì)用之前多搖一搖,電極用標(biāo)準(zhǔn)緩沖液多浸泡一會(huì)兒。”
“吳老師,流速慢可能是因?yàn)檠b填太實(shí)了,我們卸掉一點(diǎn),重新用懸浮液慢慢裝,邊裝邊輕輕敲擊柱壁試試。”
“這根硅膠管彈性不行了,孫同志,去器材室問問有沒有稍微新點(diǎn)的,實(shí)在不行,我們暫時(shí)用這段短的,多接幾個(gè)玻璃管過渡?!?
沈慕顏的冷靜和專業(yè)感染了另外兩人。老吳緊繃的臉色漸漸緩和,甚至在小孫又一次手忙腳亂差點(diǎn)打翻燒杯時(shí),破天荒地沒有斥責(zé),只是嘆了口氣,說了句慢點(diǎn),看著點(diǎn)。
小孫也在一次次實(shí)際操作中,慢慢沉下心來。
旁邊連著用各種長(zhǎng)短不一的玻璃管和硅膠管拼湊起來的管路,下面放著用于收集餾分的十幾個(gè)試管,排成一列,看起來有些寒酸。
“行了,柱子算是裝好了?!崩蠀遣亮瞬令~頭的汗,直起有些酸痛的腰:“接下來,就是把昨天分離的那點(diǎn)血漿上清液上樣了。沈醫(yī)生,你確定這柱子能掛得住凝血因子viii?別到時(shí)候蛋白全流穿了,白忙活一場(chǎng)?!?
沈慕顏看著那根簡(jiǎn)陋的層析柱,目光沉靜:“理論上,在合適的ph和離子強(qiáng)度下,凝血因子viii應(yīng)該能結(jié)合到deae上。但我們用的填料活性未知,血漿樣本也經(jīng)過了幾步粗處理,雜質(zhì)很多。
這次實(shí)驗(yàn),主要目的是驗(yàn)證這套我們東拼西湊的層析系統(tǒng)能不能跑起來,觀察蛋白的洗脫行為,收集各個(gè)餾分,然后測(cè)試有沒有凝血活性。哪怕只得到一丁點(diǎn)兒有活性的部分,就是成功。”
她總是把目標(biāo)定得實(shí)際而清晰,不盲目樂觀,也不輕易氣餒。
“開始吧?!崩蠀谴魃鲜痔?,示意小孫準(zhǔn)備好記錄本和筆。
沈慕顏深吸一口氣,拿起那個(gè)裝著經(jīng)過初步離心和冷沉淀處理的血漿上清液的小燒杯,小心地、緩慢地,將其加注到層析柱頂端的樣品池中。
淡黃色、略顯渾濁的液體,慢慢滲入白色的填料層。
所有人的目光都緊緊盯著柱子下端出口。
一秒,兩秒……淡黃色的液體開始一滴滴地,極其緩慢地,滴入第一個(gè)試管中。
“流速太慢了!”小孫忍不住低呼。
“填料阻力大,正常。”沈慕顏語氣平穩(wěn):“記下開始時(shí)間,吳老師,我們準(zhǔn)備切換平衡緩沖液,開始洗脫?!?
老吳點(diǎn)點(diǎn)頭,拿起另一個(gè)裝著預(yù)先配好,低離子強(qiáng)度緩沖液的瓶子,準(zhǔn)備在樣品液全部進(jìn)入填料后接上。
時(shí)間在寂靜而專注的等待中一分一秒過去。